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紫外分光光度測(cè)定碳酸氫鹽透析液的醋酸含量
更新時(shí)間:2019-03-20 點(diǎn)擊次數(shù):3909

紫外分光光度測(cè)定碳酸氫鹽透析液的醋酸含量

人工透析液一般用于腎功能衰竭或中毒患者體外血液透析用,是一類含有多種離子物質(zhì)的溶液,具有一定的滲透壓,通過(guò)人工腎透析膜裝置起著排除體內(nèi)代謝物、體內(nèi)毒素或過(guò)量藥物及調(diào)節(jié)體液的水-電解質(zhì)平衡等作用。

根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的中華人民共和國(guó)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》YY0598附錄A中的要求,透析液中的醋酸鈉(醋酸根)含量的測(cè)定采用液相色譜法,即選用陰離子排阻WESCAN#269-006色譜柱,用0.015mol/L的硫酸水溶液做流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)220nm,外標(biāo)法測(cè)定量。也有資料介紹采用離子交換法測(cè)定,但此法操作費(fèi)時(shí)繁瑣。購(gòu)買液相色譜需增加資金投入,因此我們嘗試采用公司現(xiàn)有的儀器紫外分光光度計(jì)UV1901PC對(duì)透析液中的醋酸根含量進(jìn)行檢測(cè)。

   我們查閱了大量的資料以尋找這方面的相關(guān)報(bào)導(dǎo)。我們參照資料介紹的方法制定了試驗(yàn)方案,并進(jìn)行了一系列的探索試驗(yàn),得到了較為滿意的結(jié)果。

1試驗(yàn)

試驗(yàn)儀器

UV1901PC雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、分析天平、容量瓶、移液管等。

試驗(yàn)藥品

氯化鈉、氯化jia、氯化鈣、碳酸氫鈉、冰醋酸等符合《中華人民共和國(guó)藥典》2005版二部相關(guān)要求;氯化鎂符合國(guó)家藥品監(jiān)督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-1001-HD-0476-2002有關(guān)規(guī)定;醋酸鈉合國(guó)家藥品監(jiān)督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-1001-HD-0584-2002有關(guān)規(guī)定。

1.3 選取測(cè)定波長(zhǎng)試驗(yàn)

1.3.1醋酸特征波長(zhǎng)試驗(yàn):用移液管量取適量的醋酸溶液加蒸餾水配制成3.8mol/L醋酸水溶液,以蒸餾水做空白,在190-900nm下掃描,沒(méi)有大吸收峰。

1.3.2 醋酸鈉特征波長(zhǎng)試驗(yàn):稱取一定量的醋酸鈉,用蒸餾水配置成6g/L的水溶液,以蒸餾水做空白,在190-1100Nm之間掃描,發(fā)現(xiàn)在220nm處有一大吸收峰。

干擾因素的觀察:將上述藥品按表2透析液組分的配方制成透析液,不加醋酸和碳酸氫鈉,以蒸餾水做空白,在190-1100nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描,在197nm處有一大吸收峰,在220nm處吸收值很小。

檢測(cè)波長(zhǎng)的確定:從上述2.3.1,2.3.2,2.3.3試驗(yàn)可知,選取220nm測(cè)定波長(zhǎng)適合。這是因?yàn)椋?/span>1醋酸在190-1100Nm沒(méi)有大吸收峰,無(wú)法直接測(cè)定;2、在透析液中有碳酸氫鈉存在,能與醋酸起化學(xué)反應(yīng)生成醋酸鈉,所以只要測(cè)定醋酸鈉的含量就可這算成醋酸(根)含量;3、在220nm處透析液其它組分吸收值很小,對(duì)醋酸鈉含量的測(cè)定不產(chǎn)生干擾。

1.4 供試液的制備

1.4.1濃縮液的配制:為使配制的供試液均勻、重復(fù)性好且誤差小,我們將配方中含量較少的組分先制備成濃縮液,然后再按比例稀釋成透析液。

 

1.4.2 透析液制備:按透析液的配方,以配制1000ml透析液計(jì)算,各組分加入量。

1.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線供試液的制備:以表2配方為基礎(chǔ),改變醋酸濃縮液的加入量,制成一系列醋酸濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.5標(biāo)準(zhǔn)曲線

 

將表3醋酸濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)液在220nmUV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的比色槽以蒸餾水做空白分別測(cè)試各溶液的吸光度值,每個(gè)濃度平行測(cè)試3次。

 

1.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:以醋酸鈉濃度為橫坐標(biāo),以吸光度平均值為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 

1.5.2 線性回歸方程制作:將表4數(shù)據(jù)作線性回歸,得到回歸方程:

C=119.56A-2.39mmol/L 式中 C----醋酸鈉含量,mmol/L

A------吸光度值。

1.5.3 線性相關(guān)檢驗(yàn):將線性回歸數(shù)據(jù)作線性回歸檢驗(yàn),得到可決系數(shù)R21.003,相關(guān)系數(shù)等于1.0,由此可見(jiàn),醋酸鈉含量與吸光度值*線性相關(guān)。

供試樣品的測(cè)試

取費(fèi)森尤斯碳酸氫鈉透析粉,按使用說(shuō)明配制成透析液,在220nm波長(zhǎng)處用UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的比色槽以蒸餾水做空白直接測(cè)定溶液的吸光度,將吸光度數(shù)據(jù)代入回歸方程可計(jì)算出溶液中醋酸鈉的含量,或者從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接查得測(cè)試結(jié)果,以此計(jì)算出透析液中的醋酸含量。

1.6.1 費(fèi)森尤斯透析液的配制:產(chǎn)品分為AB兩種干粉。按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)要求的比例直接配制成1000ml透析液。

 

1.6.2 供試液醋酸鈉含量的測(cè)試:將表5制備的供試液在220nm波長(zhǎng)處用UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的比色槽以蒸餾水做空白直接測(cè)定溶液的吸光度,將吸光度值代入回歸方程計(jì)算出透析液中的醋酸鈉含量,然后折算出溶液中醋酸的含量。

 

 

結(jié)論及討論

2.1試驗(yàn)證明,用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法替代液相色譜法測(cè)定透析液中的醋酸含量方法是可行的。因?yàn)橘M(fèi)森尤斯碳酸氫鈉透析液中醋酸含量的標(biāo)示值為2.5~4.5mol/l,并且國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的中華人民共和國(guó)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》網(wǎng)上征求意見(jiàn)稿中要求醋酸含量應(yīng)為標(biāo)示量的±10%,由結(jié)果可知,測(cè)定結(jié)果全部在標(biāo)示量范圍內(nèi),且重復(fù)性良好。

 

紫外測(cè)定透析液中的醋酸含量試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作不能選擇不加醋酸的透析液作為空白溶液,必須用配制透析液的蒸餾水(或透析用水)做空白。從表4可以看出,未加入醋酸的透析液其吸光度測(cè)定結(jié)果偏離標(biāo)準(zhǔn)曲線,這是因?yàn)椋尤氪姿岬耐肝鲆旱娜芤航M成發(fā)生了改變,醋酸與溶液中一部分碳酸氫鈉發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)生成了醋酸鈉,使溶液中碳酸氫鈉濃度江都,溶液特征發(fā)生變化,導(dǎo)致溶液吸光度產(chǎn)生偏離。因此,用配制透析液的蒸餾水或透析用水作空白是實(shí)驗(yàn)的正確選擇,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中能明顯看出這一點(diǎn)。

 

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